ポリアクリルアミドゲル電気泳動の注意事項

· ポリアクリルアミドゲルは、アクリルアミドモノマー、重合出発物質、触媒、および塩と緩衝液の混合物の右側によって必要です。

· アクリルアミドおよびBIS（N、N ' - メチレン二重アクリルアミド）は、モノマー型ゲルマトリックスです。

・過硫酸アンモニウムは、接着重合プロセスを開始します。接着剤の製剤には、水中で調製された10％のペルサル硫酸アンモニウム溶液が必要です。情報のほとんどは、積極的な使用の必要性を示しています。ただし、10％の溶液は、活動を大幅に喪失することなく、数週間4°に配置できます。最大10 mLを作り、接着剤が集約に失敗したときに破棄します。

ヒント：の割合アクリルアミドシーケンスで接着剤とタンパク質接着剤は同じではありません。以前のアクリルアミド：BIS溶液を使用する場合は、必ず正しいボトルを入手してください。

・temed（n、n、n '、n' - テトラメチルエチレンジアミン）は、冷蔵庫に入れられた茶色のボトルの触媒です。接着剤を注ぐ直前に追加します。

・ポリアクリルアミド電気泳動は、電気泳動で使用されているガラスを毎回前後に洗浄する必要があります。電気泳動後、熱い石鹸水で柔らかいブラシと布で洗い、蒸留水ですすぎ、乾燥させます。

・水分とほこりは、中空のポリマーで引き起こされる可能性があります。電気泳動の前に、ガラス板をガラスクリーナーで掃除し、柔らかいブラシで拭きます。蒸留水で洗浄し、紙の拭き取りで徹底的に乾燥させます。紙で拭く前に70％のエタノールですすいでいると、乾燥をきれいにしてスピードアップするのに役立ちます。アクリルアミドのサンプルを連続して追加します：ビス、水、緩衝液、周硫酸アンモニウム、測定。よく振ってすぐに注ぎます。

重合する前にポリアクリルアミドを脱ガスする必要はありません。 （酸素が重合を阻害するため、アクリルアミドを真空にして気泡を除去していました。）

水平接着剤ポイントのサンプルのヒント。

・黒い紙を下の箱に入れて、黒い背景に入れて、サンプルの穴を作って、よりはっきりと見るようにします。
・コロイドのすぐ上の接着タンク充填バッファー。
・エッジに光がある場合は、ライトをオンにして、コロイドを輝かせます。サンプルをピペットに描きます。
・自動ピペッティングデバイスの使用。
・10-200では、サンプル上のほとんどのポイントで液体移動点を使用できます。非常に小さなサンプル穴（10μ1未満）の場合、シーケンス接着剤に使用される長いピペットヘッドの方が便利です。

・ピペッティングはサンプルに浸し、ゆっくりと移動する液体を吸入します。サンプルはグリセリンに粘着性があるように見える可能性があり、迅速なポンピングはピペットヘッドに気泡を引き込む可能性があります。

・ピペッティングヘッドを吸い込んだ後のサンプルは、パイプの端で液体ヘッドを静かに動かしたり、液滴の外側に液体の頭を吸います。サンプルを吸わないように注意してください。

サンプルをサンプル穴に入れます

・ピペット装置は、少し圧力をかけるために、サンプルをオーバーフローの液体ヘッドにわずかに動かします。
・バッファーに挿入されたピペッティングヘッドは、スポットホールよりわずかに高く、陽圧を維持します。ピペットの先端は小さな穴に挿入できます。
・サンプルをゆっくりと着実にアウトします。ピペットの先端はポイントサンプル穴の上に配置され、サンプルは穴に沈みます。サンプルを沈めて、押し込むのではなく、サンプルの穴を埋めます。
・液体ヘッドを備えたサンプルの最後のドロップが2番目のレッグに移動し、ゆっくりと液体の移動を上げ、バッファーから移動します

垂直接着剤のサンプリングを行う方法は？

・2つのガラスの間に形成された垂直接着剤ポイントサンプル穴。非常に薄い接着剤では、ピペットの頭を2つのガラス板の間に挿入することさえできません。グリセリンを見てください！ピペットの頭をサンプルの穴に置くと、サンプルが穴に沈みます。
・ポイントサンプルの前に、ポリプロピレンアシルゲルサンプルの穴の垂直点をきれいにすすぎます。未力のアクリルアミドとサンプル穴の底に現れる可能性のある水を洗い流します。水は、サンプルの穴を大幅に小さくすることができます。 25mlまたは50mlシリンジと18ゲージの針を使用します。電気泳動緩衝液を注ぎ、サンプル穴を慎重に洗い​​流します。
・サンプルの穴を見るのは難しい場合がありますが、同じ場合、残りは簡単です。余分な穴がある場合、サンプルバッファーはブロモフェノールブルーでテストできます。